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        A549、HT-29、CAL-27、MDA-MB-231細胞培養技術分享
        更新時間:2024-02-27   點擊次數:821次

        影響影子:IF:16.6
        發表期刊:Nature Communications
        Doi: 10.1038/s41467-022-28213-y

        原文標題:Electron transfer-triggered imaging of EGFR signaling activity
        背景:生物過程中的能量轉移是通過電子和質子的轉移來實現的,在腫瘤發展進程中,與正常細胞相比,腫瘤細胞實現了極其活躍的電子轉移,以支持其增殖、分化和遷移。如果能夠通過監測與腫瘤增殖相關信號通路的電子轉移,則有可能在此基礎上進行治療干預。
        方法:研究了用于電子轉移觸發成像的ETTE納米探針在腫瘤治療過程中的動態監測。通過納米探針設計,免疫熒光,western蛋白印跡等方法探究了使用ETTEE納米探針作為顯像劑,在A549肺癌細胞中對EGFR信號通路活性進行成像的效果。通過免疫組化,小鼠活體成像等方法并利用肺癌小鼠模型評估了ETTE納米探針在腫瘤治療過程中對EGFR信號通路活性的動態監測能力。

        結果:我們設計的ETTE納米探針,通過使用二茂鐵-DNA聚合物鏈,在信號通路激活過程中將轉移的電子改變為光信號,可以在時間和空間尺度上進行活體成像。進一步在A549細胞中使用ETTE納米探針對EGFR信號通路進行成像驗證了EGFR激活水平較高的細胞可以產生更強的信號,即在細胞水平上,EGFR相關信號通路的激活可以通過ETTE納米成像探針實現可視化。基于腫瘤治療過程中EGFR活性下降我們進一步利用ETTE納米探針對腫瘤治療過程進行動態監測,結果顯示治療組腫瘤部位有更弱的信號。

        結論:綜上所述,我們的研究表明,ETTE納米探針可以在腫瘤治療過程中實現對EGFR信號通路活性的動態監測,并有望在后續的治療決策和預后中發揮關鍵作用。


        文章引用:

        Cell Culture

        A549 cells: A549 cells derived from two different sources, American Type Culture Collection (ATCC) and China Center for Type Culture Collection (CCTCC). The A549 cells were maintained in DMEM high glucose (Gibco™, USA) with 10% fetal bovine serum (Zeta life, USA) and 1% penicillin/streptomycin (New Cell & Molecular Biotech, Co., Ltd).

         

        HT-29 cells: HT-29 cells were derived from CCTCC. The HT-29 cells were maintained in DMEM high glucose (Gibco™, USA) with 10% fetal bovine serum (Zeta life, USA) and 1% penicillin/streptomycin (New Cell & Molecular Biotech, Co., Ltd).

         

        CAL-27 cells: CAL-27 cells were derived from CCTCC. The CAL-27 cells were maintained in DMEM high glucose (Gibco™, USA) with 10% fetal bovine serum (Zeta life, USA) and 1% penicillin/streptomycin (New Cell & Molecular Biotech, Co., Ltd).

         

        MDA-MB-231 cells: MDA-MB-231 cells were derived from CCTCC. The MDA-MB-231 cells were maintained in DMEM high glucose (Gibco™, USA) with 10% fetal bovine serum (Zeta life, USA).

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        文章培養細胞方法總結
        A549、HT-29、CAL-27、MDA-MB-231細胞均使用ZETA life含有10%血清及1%青/鏈霉素的高糖DMEM培養基培養,MDA-MB-231細胞使用含有10%血清的高糖DMEM培養基培養。上述細胞正常培養后,提取細胞蛋白,通過Western blot檢測EGFR表達水平。同時,培養的A549細胞移植到小鼠體內,并通過活體成像實時觀察腫瘤生長情況。結果表明,使用ZETA life胎牛血清培養的A549細胞移植后,能夠形成穩定的小鼠腫瘤模型。備注:A549:人非小細胞肺癌細胞;HT-29 :人結腸癌細胞;CAL-27:人舌鱗癌細胞;MDA-MB-231:人乳腺癌細胞。

        引用產品

        胎牛血清fetal bovine serum (Zeta life, USA)

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